Ključna razlika - Nitroceluloza i najlonska membrana
Blotting je važna tehnika za otkrivanje specifičnih sekvenci DNA, RNA i proteina iz njihovih smjesa u molekularnoj biologiji. Radi se pomoću membrane koja se naziva mrlja. Postoje različite tehnike blotiranja kao što su sjeverno, južno i zapadno blotiranje. Odabir odgovarajuće membrane za postupak upijanja treba pažljivo obaviti kako bi se spriječilo nespecifično vezanje i pogrešno otkrivanje. Nitroceluloza, najlon i PVDF su često korištene membrane u tehnikama blotiranja. Imaju različite karakteristike. Ključna razlika između nitroceluloze i najlonske membrane je u tome što nitrocelulozne membrane imaju visok potencijal imobilizacije proteina, dok najlonske membrane imaju visok potencijal imobilizacije nukleinske kiseline. Međutim, obje vrste membrana često se koriste u tehnikama mrljanja.
SADRŽAJ
1. Pregled i ključna razlika
2. Što je nitrocelulozna membrana
3. Što je najlonska membrana
4. Usporedba - nitroceluloza i najlonska membrana
5. Sažetak
Što je nitrocelulozna membrana?
Nitrocelulozna membrana je često korišteni membranski filtar u tehnikama blotiranja nukleinske kiseline i proteina. Ima visok potencijal vezanja na proteine. Stoga se nitrocelulozne membrane široko koriste u tehnici vestern blot-a. Nitrocelulozne membrane kompatibilne su sa svim tehnikama hibridizacije i pokazuju superiorne sposobnosti vezanja bez ometanja. Nitrocelulozne membrane su prirodno hidrofilne prirode. Oni ostvaruju hidrofilnu interakciju s molekulama i učinkovito ih imobiliziraju na membranu. Komercijalne nitrocelulozne membrane dostupne su u dvije veličine pora: 0,45 i 0,2 µm.
Slika 01: Nitrocelulozna membrana koja se koristi u Western blot-u
Što je najlonska membrana?
Najlonska membrana je još jedna vrsta komercijalne membrane koja se koristi u tehnikama mrljanja. Alternativno se koristi s nitroceluloznim membranama za južno i sjeverno mrljanje. Najlonske membrane idealne su za bloting u južnom obliku od nitroceluloze zbog visokog afiniteta za vezanje s DNA. Zbog nekoliko jedinstvenih značajki najlonskih membrana, istraživači obično koriste najlonske membrane za južno i sjeverno mrljanje umjesto umjesto nitrocelulozne membrane. Najlonske membrane također se preporučuju za skidanje i ponovno sondiranje, za razliku od nitroceluloze.
Slika 02: Najlonska membrana koja se koristi za južno mrljanje
Koja je razlika između nitroceluloze i najlonske membrane?
Diff Article Sredina prije tablice
Nitroceluloza vs najlonska membrana |
|
| Nitrocelulozne membrane su lomljive. | Najlonske membrane su manje krhke. |
| Rukovanje | |
| S njima je teško rukovati. | Lako se njima rukuje. |
| Prigovarajući | |
| Nepodržane nitrocelulozne membrane teško je ispitati. | Ispitivanje je jednostavno pomoću najlonskih membrana. |
| Kompatibilnost s različitim uvjetima skladištenja | |
| Nitrocelulozne membrane imaju manje čvrstoće da izdrže različite uvjete skladištenja. | Najlonske membrane robusnije reagiraju na različite uvjete skladištenja. |
| Koristiti | |
| Potrebno je predmočenje. | Prethodno vlaženje nije potrebno za najlonske membrane. |
| Hidrofilna priroda | |
| Nitrocelulozne membrane su hidrofilne prirode, ali su manje hidrofilne od najlonskih membrana. | Prirode su vrlo hidrofilne. |
| Potencijal imobilizacije | |
| Nitrocelulozne membrane imaju manji afinitet za nukleinske kiseline. Ali ima visok afinitet za proteine. | Najlonske membrane imaju visok potencijal vezanja s nukleinskim kiselinama od nitroceluloznih membrana. |
Sažetak - Nitroceluloza vs najlonska membrana
Nitrocelulozne i najlonske membrane su posebni listovi koji se koriste u tehnici upijanja kako bi se reproducirao uzorak traka na gelu. Omogućuju mogućnost otkrivanja određenog slijeda ili proteina iz smjesa njihovim imobilizacijom na membrani. Jednom kada se molekule imobiliziraju na membrani, ona se može koristiti kao supstrat za hibridizacijsku analizu s označenim sondama. Nitrocelulozna membrana obično se koristi za otkrivanje proteina u Western blot tehnici zbog visokog afiniteta vezivanja za proteine. Najlonske membrane se često koriste za južno i sjeverno mrljanje. To je razlika između nitroceluloze i najlonske membrane.
