Ključna razlika - YAC vs BAC vektori
Vektori se koriste u molekularnom kloniranju. Vektor se može definirati kao molekula DNA koja se ponaša kao sredstvo za prijenos stranog genetskog materijala u drugu stanicu. Vektor koji sadrži stranu DNA poznat je kao rekombinantna DNA i trebao bi imati sposobnost replikacije i ekspresije u organizmu domaćina. Umjetni kromosom kvasca (YAC) i bakterijski umjetni kromosom (BAC) dvije su vrste vektora koji sudjeluju u kloniranju. Ključna razlika između YAC i BAC je u tome što je YAC umjetno izgrađeni vektorski sustav koji koristi određeno područje kromosoma kvasca za umetanje velikih segmenata genetskog materijala u stanice kvasca, dok je BAC umjetno izgrađeni vektorski sustav koji koristi određeno područje kromosoma E. coli za umetanje velikih segmenata DNA u stanice E. coli.
SADRŽAJ
1. Pregled i ključna razlika
2. Što su YAC vektori
3. Što su BAC vektori
4. Usporedna usporedba - YAC i BAC vektori
5. Sažetak
Što su YAC vektori?
YAC (kvasac umjetni kromosom) je umjetno izgrađeni kromosom koji ima sposobnost nositi velik segment strane DNA i replicirati se unutar stanica kvasca. Ima centromere, telomere, kao i autonomno replicirajuće sekvence koje su ključne za replikaciju i stabilnost. YAC bi također trebao nositi selektivni marker ili markere i restrikcijska mjesta kako bi postao učinkovit vektor kloniranja. Veliki slijed u rasponu od 1000 kb do 2000 kb može se umetnuti u YAC i prenijeti u kvasac. Učinkovitost transformacije YAC je vrlo niska.
Slika 01: YAC vektor
Što su BAC vektori?
Bakterijski umjetni kromosom (BAC) je umjetno konstruirani kromosom za molekularno kloniranje. Ima specifična područja E. coli F plazmida i kružan je i super smotan. BAC je razvijen za kloniranje fragmenata DNA bakterijama, posebno E. coli. Može nositi fragmente DNA veličine do 300 kb. U usporedbi s YAC-om, umeci za kloniranje BAC-a manje su veličine. BAC-ovi su razvijeni 1992. godine, a i dalje je popularan zbog svoje stabilnosti i jednostavnosti izrade. BAC su također korisni u razvoju cjepiva.
Slika 02: BAC vektor u molekularnom kloniranju
Koja je razlika između YAC i BAC vektora?
Diff Article Sredina prije tablice
YAC vs BAC vektori |
|
YAC je genetski modificirani kromosom koji koristi DNA kvasca u svrhu kloniranja. | BAC je genetski modificirana molekula DNA koja koristi DNA E. coli u svrhu kloniranja. |
Spol | |
YAC-ovi su dizajnirani za kloniranje velikih fragmenata genomske DNA u kvasac. | BAC su razvijeni za kloniranje velikih genomskih fragmenata u Escherichia coli. |
Duljina umetanja | |
YAC-ovi mogu sadržavati genomske umetke veličine megabaze (1000 kb - 2000 kb). | BAC-ovi mogu nositi umetke veličine 200–300 kb ili manje. |
Izgradnja | |
YAC DNK je teško pročistiti netaknutim i zahtijeva visoku koncentraciju za stvaranje YAC vektorskog sustava. | BAC je lako pročistiti netaknut i lako se može konstruirati. |
Kimerizam | |
YAC-ovi su često himerni. | BAC su rijetko himerni. |
Stabilnost | |
YAC je nestabilan. | BAC je stabilan. |
Izmjene | |
Rekombinacija kvasca je vrlo izvediva i uvijek ostaje aktivna. Stoga može generirati brisanja i druga preslagivanja u YAC-u. | Sprečava se rekombinacija E. coli i uključuje se po potrebi. Stoga smanjuje neželjena preslagivanja u BAC-ovima. |
Održavanje | |
Manipulacija rekombinantnim YAC-om obično zahtijeva prijenos YAC-a u E. coli za naknadnu manipulaciju. Dakle, to je naporan proces. | Modifikacija BAC-a događa se izravno u E. coli. Dakle, nema potrebe za prijenosom DNA. Dakle, postupak nije naporan. |
Sažetak - YAC vs BAC vektori
YAC je postao važan istraživački alat u procesima kloniranja zbog svoje sposobnosti kloniranja velikih fragmenata DNA u organizam domaćina. Međutim, YAC imaju nekoliko nedostataka kao vektora kao što su poteškoće u gradnji, himernost, nestabilnost itd. Stoga su znanstvenici razvili BAC vektore da bi prevladali ove probleme. BAC je konstruiran pomoću specifičnih regija kromosoma E. coli. To je stabilan vektor i lako se može konstruirati. Međutim, duljina DNA s kojom BAC može rukovati je do 20 puta manja od dužine YAC-a. To je razlika između YAC i BAC vektorskih sustava. Danas je BAC u laboratorijima preferiraniji od YAC-a.