Ključna razlika - HPLC vs LCMS
Pogledajmo prvo značenje HPLC-a i LCMS-a prije nego što analiziramo razliku između HPLC-a i LCMS-a. Kromatografija je tehnika odvajanja u kemijskoj analizi gdje se sastojci uzorka odvajaju tijekom prolaska kroz kromatografski medij. Također uključuje interakciju s uzorkom, stacionarnu fazu i mobilnu fazu. HPLC je kratica za tekućinsku kromatografiju visokih performansi, a koristi se kao metoda tekuće kromatografije u analitičkoj kemiji. Kombinacija tekuće kromatografije i masene spektroskopije (LCMS) razvijena je za kvantitativnu analizu odabranih biomolekula i vrlo je osjetljiv, točan i specifičan postupak ispitivanja u usporedbi s HPLC-om. To je ključna razlika između HPLC i LCMC. Ovaj će vas članak upoznati s HPLC-om i LCMC-om koji se bave kemijskom analizom i raspraviti o razlikama između HPLC-a i LCMS-a.
Što je HPLC?
Tekuća kromatografija visokih performansi (HPLC) popularna je tehnika odvajanja u analitičkoj kemiji. Uglavnom se koristi za razdvajanje komponenata, prepoznavanje i kvantificiranje svake komponente u smjesi. Ranije je ova metoda bila poznata kao visokotlačna tekućinska kromatografija, jer je ovisila o pumpama da tekuće otapalo pod tlakom koje sadrži smjesu uzorka protječe kroz kolonu napunjenu čvrstim adsorbenskim materijalom. Svaki sastojak u smjesi uzorka različito djeluje s čvrstim adsorbenskim materijalom, što rezultira različitim brzinama protoka za različite sastojke. To može dovesti do odvajanja sastojaka dok izlaze iz HPLC kolone.
HPLC se koristi za razne primjene kao što su analiza razine vitamina D u krvi, ilegalna uporaba droga sportaša otkrivanjem ostataka lijeka u mokraći, razvrstavanje sastojaka složenog biološkog uzorka u istraživačke svrhe te analiza i proizvodnja lijekova.
Što je LCMS?
Tekuća kromatografija – masena spektrometrija (LCMS) analitička je tehnika koja kombinira sposobnosti fizičkog razdvajanja tekućinske kromatografije sa sposobnostima masene spektrometrije (MS). Tekuća kromatografija tehnika je razdvajanja, a masena spektrometrija koristi se za analizu omjera mase i naboja nabijenih čestica. Fizičko razdvajanje obično se postiže HPLC-om, a alternativno, LCMS poznat i kao HPLC-MS. LCMS je dominantna analitička tehnika koja ima vrlo visoku točnost, osjetljivost i specifičnost u usporedbi s HPLC-om. Stoga je koristan u mnogim aplikacijama kao što su istraživačke svrhe, analiza lijekova, analiza hrane itd. LCMS se uglavnom koristi za odvajanje, otkrivanje, identificiranje i kvantificiranje biokemijskih svojstava određenog uzorka u prisutnosti složenih kemijskih smjesa.
Koja je razlika između HPLC i LCMC?
Skraćenica i definicija HPLC i LCMC
HPLC: HPLC je kratica za tekućinsku kromatografiju visokih performansi. To je tehnika odvajanja koja se uglavnom koristi za odvajanje komponenata, prepoznavanje i kvantificiranje svake komponente u smjesi.
LCMS: LCMS je kratica za tekuću kromatografiju i masenu spektrometriju. To je analitička tehnika koja kombinira sposobnosti fizičkog razdvajanja tekućinske kromatografije sa sposobnostima masene spektrometrije (MS).
Karakteristike HPLC i LCMC
Klasifikacija
HPLC: Ovo je samo metoda tekuće kromatografije.
LCMS: Ovo je kombinacija metode tekuće kromatografije i metode masene spektrometrije.
Učinkovitost
HPLC: U usporedbi s LCMS-om, HPLC analiza je manje učinkovita i sporija.
LCMS: U usporedbi s HPLC, LCMS analiza je učinkovita i brža.
Osjetljivost
HPLC: U usporedbi s LCMS-om, HPLC analiza je manje osjetljiva.
LCMS: U usporedbi s HPLC, LCMS analiza je osjetljivija.
Specifičnost
HPLC: U usporedbi s LCMS-om, HPLC analiza je manje specifična.
LCMS: U usporedbi s HPLC, LCMS analiza je specifičnija.
Točnost
HPLC: HPLC daje manje točne rezultate od LCMS-a za određivanje nekih kemikalija.
LCMS: LCMS daje preciznije rezultate od HPLC-a za određivanje nekih kemikalija.
Komponenta
HPLC: HPLC se može smatrati komponentom LCMS-a.
LCMS: LCMS se ne može smatrati komponentom HPLC-a.
Izvor jona
HPLC: Izvor jona ne postoji u HPLC instrumentu.
LCMS: Izvor jona prisutan je u instrumentu LCMS.
Prijave
HPLC: Joni, polimeri, organske molekule i biomolekule mogu se analizirati pomoću HPLC.
LCMS: Mogu se analizirati organske molekule i biomolekule. Suprotno HPLC-u, LCMS se može koristiti za ispitivanje nepotpuno razriješenih smjesa.
Operacija
HPLC: Dijagram HPLC instrumenta dat je na slici 1, a obično uključuje autosampler, pumpe i detektor. Mješač uzorka uvodi smjesu uzorka u mobilnu fazu (smjesa otapala pod tlakom poput vode, acetonitrila i / ili metanola) koja je prebacuje u kolonu. Crpke isporučuju željeni protok i sastav pokretne faze kroz kolonu. Stupac je ispunjen adsorbentom, koji je zrnasta čvrsta čestica poput silicijevog dioksida ili polimera. Detektor proizvodi signal proporcionalan količini prisutnosti sastojka uzorka u koloni, što omogućava kvantificiranu analizu odabranih sastojaka uzorka. Instrumentom HPLC upravlja se, a analizu podataka pruža digitalni mikroprocesor i korisnički softver.
Slika 1: Dijagram HPLC instrumenta
LCMS: Dijagram LCMS instrumenta dat je na slici 2. Ekstrakt uzorka umetnut je u kolonu koja se sastoji od HPLC. Ovaj stupac zadržava uzorke metabolita na temelju fizičkih karakteristika, a različiti metaboliti teku u maseni spektrometar u različitim vremenskim intervalima. Masena spektroskopija koristi se za procjenu masa čestica, za određivanje elementarnog rasporeda molekule i za razjašnjavanje struktura molekula. Međutim, uzorak treba ionizirati kako bi se stvorile nabijene molekule kako bi se utvrdili njihovi omjeri mase i naboja. Stoga se umjesto HPLC instrumenata LCMS sastoje od dodatna tri modula kao što su izvor željeza, analizator mase i detektor. Izvor iona može transformirati uzorak plinske faze u ione i analizator mase koji grupira ione po njihovim masama pomoću elektromagnetskih polja. Konačno,detektor kvantificira vrijednosti i isporučuje podatke o svakom ionu prisutnom u uzorku. LCMS tehnika može se koristiti i za kvalitativne i za kvantitativne primjene.
Slika 2: Dijagram LCMS instrumenta
Zaključno, HPLC je metoda tekuće kromatografije dok je LCMS kombinacija tekuće kromatografije i masene spektrometrije. Obje ove tehnike analize imaju različite karakteristike, ali se mogu koristiti za identificiranje i kvantificiranje sastava hrane, lijekova i drugih bioaktivnih molekula.
