Ključna razlika - HPLC vs HPTLC
Ključna razlika između HPLC i HPTLC je u tome što HPLC omogućuje kvantitativno odvajanje komponenata u uzorku, dok HPTLC ne dopušta kvantitativno odvajanje komponenata u uzorku.
Kromatografija je metoda fizičkog odvajanja koja se koristi za odvajanje i identificiranje komponenata u smjesi. I HPLC i HPTLC su kromatografske tehnike. HPLC je tekućinska kromatografija visokih performansi. HPTLC je tankoslojna kromatografija visokih performansi.
SADRŽAJ
1. Pregled i ključna razlika
2. Što je HPLC
3. Što je HPTLC
4. Usporedba - HPLC vs HPTLC u tabličnom obliku
5. Sažetak
Što je HPLC?
HPLC je tekućinska kromatografija visokih performansi. To je analitička tehnika koja se koristi za odvajanje, identificiranje i kvantificiranje komponenata u smjesi. U ovoj se tehnici uzorak otopi u prikladnom otapalu. Zatim se otapalo s uzorkom propušta kroz pumpu s zadanim tlakom. Pumpa je napunjena čvrstim adsorbenskim materijalom. Tada se neke komponente jako vežu za upijajući materijal, dok se druge komponente labavo vežu. To uzrokuje različiti protok komponenata kroz pumpu. Stoga se komponente mogu lako razdvojiti.
Slika 01: HPLC sustav
Adsorbent koji ispunjava pumpu poznat je kao stacionarna faza. Otapalo s otopljenim uzorkom poznato je kao mobilna faza. Pumpa koja se koristi u ovoj tehnici naziva se kolona. Stupac je ispunjen adsorbentom, najčešće česticama silicijevog dioksida. Veličina tih čestica može se kretati od 2-50 μm. Na postupak odvajanja utječe sastav pokretne faze i temperatura sustava. Interakcije između stacionarne faze i komponente u uzorku mogu biti hidrofobne interakcije, dipol-dipolne interakcije, ionska veza itd.
Radni tlak HPLC-a znatno je veći od tlaka tradicionalne tekućinske kromatografije. Leži oko 50-350 bara. Razlika između tekuće kromatografije i HPLC je u tome što kod tekuće kromatografije uzorak pada kroz kolonu pod gravitacijom, dok se u HPLC uzorak tlači kroz kolonu. Veličina kolone i upijajuće čestice također su vrlo male u usporedbi s tradicionalnom tekućinskom kromatografijom. Međutim, razlučivost koju daje HPLC tehnika je superiornija.
Što je HPTLC?
HPTLC je tankoslojna kromatografija visokih performansi. To je napredni i automatizirani oblik tradicionalnog TLC-a. Ova tehnika omogućuje učinkovito rješavanje u kratkom vremenskom razdoblju. U ovoj metodi analize uzorak i referenca mogu se istodobno analizirati, što omogućuje usporedbu uzorka s referencom. Daje poboljšanu analitičku točnost od ostalih kromatografskih tehnika. Vrijeme potrebno za analizu je manje. Tehnika je jeftina tehnika.
Slika 02: Analiza prehrambenih boja pomoću HPTLC
HPTLC metoda je jednostavan postupak, a korak pripreme uzorka također se uklanja (u tradicionalnoj TLC, korak pripreme uzorka uključuje se prije odvajanja. Ovaj korak uključuje čišćenje i obogaćivanje). Otapalo se može koristiti izravno bez bilo kakve prethodne obrade, iako druge kromatografske tehnike zahtijevaju predobrade kao što su otplinjavanje, filtracija itd.
Adsorbent koji se koristi u HPTLC je silicijev dioksid s vrlo malim veličinama čestica. U tradicionalnom TLC, veličina čestica silicijevog dioksida je 5-20 μm, dok je u HPTLC 4-8 μm. Uzorak se aplicira na HPTLC ploču. Daje jednoliku i sigurnu primjenu. Zatim se ploče stavljaju u komoru koja ima pokretnu fazu. Komora treba biti zasićena parom mobilne faze. Nakon HPTLC postupka mogu se otkriti mjesta koja su se pomaknula. Kada otkriva mrlje na ploči, HPTLC tehnika koristi prikladno UV područje ili jodnu komoru.
Koja je razlika između HPLC i HPTLC?
Diff Article Sredina prije tablice
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC je tekućinska kromatografija visokih performansi. | HPTLC je tankoslojna kromatografija visokih performansi. |
| Tehnika | |
| U HPLC-u, mobilna faza s otapalom prolazi kroz kolonu napunjenu nepokretnom fazom. | U HPTLC, uzorak se uoči na TLC pločici i stavi u komoru koja sadrži mobilnu fazu; tada se uzorku dopušta da migrira prema ploči zajedno s pokretnom fazom. |
| Mjerenje | |
| U HPLC se razlike između brzina protoka komponenata kroz kolonu koriste za odvajanje komponenata u uzorku. | U HPTLC-u se razlike između prijeđenih putova svake komponente u uzorku koriste za odvajanje komponenata u uzorku. |
| Kvantitativno razdvajanje | |
| HPLC omogućuje kvantitativno razdvajanje komponenata u uzorku. | HPTLC ne dopušta kvantitativno razdvajanje komponenata u uzorku. |
Sažetak - HPLC vs HPTLC
HPLC i HPTLC dvije su kromatografske tehnike. Ključna razlika između HPLC i HPTLC je u tome što HPLC omogućuje kvantitativno odvajanje komponenata u uzorku, dok HPTLC ne dopušta kvantitativno odvajanje komponenata u uzorku.
