Razlika Između Prijelazne I Stabilne Transfekcije

2024 Autor: Mildred Bawerman | [email protected]. Zadnja promjena: 2023-12-16 08:39

Ključna razlika - Prolazna i stabilna transfekcija

Transfekcija je postupak koji je uključen u prijenos gena eukariotskih stanica kemijskim ili fizikalnim metodama. Transfekcija se može klasificirati u glavne dvije vrste pod nazivom prijelazna transfekcija i stabilna transfekcija. Tijekom prolazne transfekcije, gen koji se zanima ne uspijeva se integrirati s genomom domaćina i kratko se vremenski eksprimira u domaćinu, dok se kod stabilne transfekcije gen od interesa integrira s genomom domaćina i dugoročno se održava u nekoliko generacija. To je ključna razlika između prolazne i stabilne transfekcije. U oba slučaja transfekcija je uspješna, a geni se izražavaju.

SADRŽAJ

1. Pregled i ključna razlika

2. Što je prijelazna transfekcija

3. Što je stabilna transfekcija

4. Usporedna usporedba - Prijelazna i stabilna transfekcija

5. Sažetak

Što je prijelazna transfekcija?

Transfekcija je važan alat za umetanje gena u eukariotske stanice. Među dvije vrste transfekcije, privremena transfekcija čest je način prijenosa gena. Kroz vektor se strani geni transformiraju unutar stanica domaćina. Jednom kada strana DNA uđe u stanicu domaćina, ima dvije mogućnosti. Može se integrirati s genomom domaćina i replicirati ili ostati unutra bez integriranja u genom. Privremena transfekcija pokazuje privremenu ekspresiju umetnutih gena bez integriranja u genom domaćina. Geni eksprimiraju i proizvode kodirani protein dok se stanica ne podijeli. Međutim, zbog nemogućnosti integracije, ne može se replicirati i ući u buduće generacije. Ova vrsta transfekcije uspješna je kratko vrijeme. Tijekom stanične diobe ili zbog nekih drugih čimbenika strana DNA podvrgava se razgradnji. Privremena transfekcija prikazana je kada je strana DNA u obliku visoko smotane DNA.

Slika 01: Prolazna transfekcija

Što je stabilna transfekcija?

Stabilna transfekcija pokazuje uspješnu integraciju stranih gena u genom domaćina. Jednom kada strana DNA uđe unutar stanice domaćina, dio strane DNA integrira se s genomom domaćina i postaje dio njega. Stoga se strana DNA također replicira i prelazi u buduće generacije kada se replicira genom domaćina. Ova vrsta transfekcije je složena i rijetka. Međutim, zbog stabilne transfekcije u genom, ova se osobina održava kroz dulje razdoblje od nekoliko generacija.

Stabilna transfekcija težak je proces i zahtijeva učinkovitu dostavu DNA i staničnu akviziciju stranog DNA u njegov genom. Stoga linearna DNA pogoduje stabilnoj transfekciji od kružne DNA. Međutim, stabilne stope transfekcija je otprilike jedan od 10 ⁴ transformiranim stanicama. Stabilna transfekcija može se primijetiti kotransfomiranjem selektivnog markera i izvođenjem umjetne selekcije na mediju.

Slika 02: Stabilna transfekcija

Koja je razlika između privremene i stabilne transfekcije?

Diff Article Sredina prije tablice

Privremena vs stabilna transfekcija
Strana DNA se ne integrira u genom domaćina.	Strana DNA integrira se s genomom domaćina i postaje njegov dio.
Replikacija unutar hosta
Privremeno transficirani geni se ne repliciraju unutar domaćina. Stoga se geni ne prenose sljedećim generacijama.	Geni se repliciraju unutar domaćina i prenose budućim generacijama.
Vremensko trajanje ekspresije gena
Geni se izražavaju kroz određeno vremensko razdoblje, a nakon toga se uništavaju.	Geni postaju dio genoma i izražavaju se unutar generacije tijekom dugog vremenskog razdoblja.
Koristiti
Ovo je korisno za proučavanje učinaka kratkoročnog izražavanja gena ili genskih proizvoda.	Ovo je korisno za proučavanje učinaka ekspresije gena na duži rok.
Otkrivanje transfekcije
Geni se izražavaju i mogu se lako otkriti umetanjem reporter gena.	Stabilnu transfekciju lako je otkriti umetanjem oznake koja se može odabrati i odabirom putem umjetne selekcije na mediju.
Pojava i proces
Privremena transfekcija uobičajena je i nije složena za izvođenje.	Stabilna transfekcija rijetka je i složena za izvođenje.
Priroda DNA
Jako superkulatna DNA prikladna je za prolaznu transfekciju.	Linearna DNA prikladna je za stabilnu transfekciju.
Prijave
To se koristi za studije nokdauna gena ili prigušivanja s inhibitornim RNK, proizvodnje proteina u malim razmjerima	Koristi se za proizvodnju proteina u velikim, dugoročnim farmakološkim studijama, genskoj terapiji, istraživanju mehanizama dugoročne genetske regulacije

Sažetak - Prijelazna vs stabilna transfekcija

Privremene i stabilne transfekcije dvije su vrste transfekcija prikazane tijekom prijenosa gena u eukariotske stanice nevirusnim sustavima. Transformirana strana DNK nije integrirana s genomom domaćina u prolaznoj transfekciji, dok se integrira s genomom domaćina u stabilnoj transfekciji. Kružno namotana DNA pokazuje privremenu transfekciju, dok linearna DNA preferira stabilnu transfekciju. To je razlika između prolazne i stabilne transfekcije. Međutim, privremena transfekcija je češća i lakša u usporedbi sa stabilnom transfekcijom. Ali odabir jednog od dva ovisi o svrsi prijenosa gena i trajanju istraživačkog projekta.