Ključna razlika - Prolazna i stabilna transfekcija
Transfekcija je postupak koji je uključen u prijenos gena eukariotskih stanica kemijskim ili fizikalnim metodama. Transfekcija se može klasificirati u glavne dvije vrste pod nazivom prijelazna transfekcija i stabilna transfekcija. Tijekom prolazne transfekcije, gen koji se zanima ne uspijeva se integrirati s genomom domaćina i kratko se vremenski eksprimira u domaćinu, dok se kod stabilne transfekcije gen od interesa integrira s genomom domaćina i dugoročno se održava u nekoliko generacija. To je ključna razlika između prolazne i stabilne transfekcije. U oba slučaja transfekcija je uspješna, a geni se izražavaju.
SADRŽAJ
1. Pregled i ključna razlika
2. Što je prijelazna transfekcija
3. Što je stabilna transfekcija
4. Usporedna usporedba - Prijelazna i stabilna transfekcija
5. Sažetak
Što je prijelazna transfekcija?
Transfekcija je važan alat za umetanje gena u eukariotske stanice. Među dvije vrste transfekcije, privremena transfekcija čest je način prijenosa gena. Kroz vektor se strani geni transformiraju unutar stanica domaćina. Jednom kada strana DNA uđe u stanicu domaćina, ima dvije mogućnosti. Može se integrirati s genomom domaćina i replicirati ili ostati unutra bez integriranja u genom. Privremena transfekcija pokazuje privremenu ekspresiju umetnutih gena bez integriranja u genom domaćina. Geni eksprimiraju i proizvode kodirani protein dok se stanica ne podijeli. Međutim, zbog nemogućnosti integracije, ne može se replicirati i ući u buduće generacije. Ova vrsta transfekcije uspješna je kratko vrijeme. Tijekom stanične diobe ili zbog nekih drugih čimbenika strana DNA podvrgava se razgradnji. Privremena transfekcija prikazana je kada je strana DNA u obliku visoko smotane DNA.
Slika 01: Prolazna transfekcija
Što je stabilna transfekcija?
Stabilna transfekcija pokazuje uspješnu integraciju stranih gena u genom domaćina. Jednom kada strana DNA uđe unutar stanice domaćina, dio strane DNA integrira se s genomom domaćina i postaje dio njega. Stoga se strana DNA također replicira i prelazi u buduće generacije kada se replicira genom domaćina. Ova vrsta transfekcije je složena i rijetka. Međutim, zbog stabilne transfekcije u genom, ova se osobina održava kroz dulje razdoblje od nekoliko generacija.
Stabilna transfekcija težak je proces i zahtijeva učinkovitu dostavu DNA i staničnu akviziciju stranog DNA u njegov genom. Stoga linearna DNA pogoduje stabilnoj transfekciji od kružne DNA. Međutim, stabilne stope transfekcija je otprilike jedan od 10 4 transformiranim stanicama. Stabilna transfekcija može se primijetiti kotransfomiranjem selektivnog markera i izvođenjem umjetne selekcije na mediju.
Slika 02: Stabilna transfekcija
Koja je razlika između privremene i stabilne transfekcije?
Diff Article Sredina prije tablice
Privremena vs stabilna transfekcija |
|
| Strana DNA se ne integrira u genom domaćina. | Strana DNA integrira se s genomom domaćina i postaje njegov dio. |
| Replikacija unutar hosta | |
| Privremeno transficirani geni se ne repliciraju unutar domaćina. Stoga se geni ne prenose sljedećim generacijama. | Geni se repliciraju unutar domaćina i prenose budućim generacijama. |
| Vremensko trajanje ekspresije gena | |
| Geni se izražavaju kroz određeno vremensko razdoblje, a nakon toga se uništavaju. | Geni postaju dio genoma i izražavaju se unutar generacije tijekom dugog vremenskog razdoblja. |
| Koristiti | |
| Ovo je korisno za proučavanje učinaka kratkoročnog izražavanja gena ili genskih proizvoda. | Ovo je korisno za proučavanje učinaka ekspresije gena na duži rok. |
| Otkrivanje transfekcije | |
| Geni se izražavaju i mogu se lako otkriti umetanjem reporter gena. | Stabilnu transfekciju lako je otkriti umetanjem oznake koja se može odabrati i odabirom putem umjetne selekcije na mediju. |
| Pojava i proces | |
| Privremena transfekcija uobičajena je i nije složena za izvođenje. | Stabilna transfekcija rijetka je i složena za izvođenje. |
| Priroda DNA | |
| Jako superkulatna DNA prikladna je za prolaznu transfekciju. | Linearna DNA prikladna je za stabilnu transfekciju. |
| Prijave | |
| To se koristi za studije nokdauna gena ili prigušivanja s inhibitornim RNK, proizvodnje proteina u malim razmjerima | Koristi se za proizvodnju proteina u velikim, dugoročnim farmakološkim studijama, genskoj terapiji, istraživanju mehanizama dugoročne genetske regulacije |
Sažetak - Prijelazna vs stabilna transfekcija
Privremene i stabilne transfekcije dvije su vrste transfekcija prikazane tijekom prijenosa gena u eukariotske stanice nevirusnim sustavima. Transformirana strana DNK nije integrirana s genomom domaćina u prolaznoj transfekciji, dok se integrira s genomom domaćina u stabilnoj transfekciji. Kružno namotana DNA pokazuje privremenu transfekciju, dok linearna DNA preferira stabilnu transfekciju. To je razlika između prolazne i stabilne transfekcije. Međutim, privremena transfekcija je češća i lakša u usporedbi sa stabilnom transfekcijom. Ali odabir jednog od dva ovisi o svrsi prijenosa gena i trajanju istraživačkog projekta.
