Ključna razlika - Gram Stain vs Acid Fast
Bakterije su vrlo mali mikroorganizmi. Oni su prozirni, a njihovo je otkrivanje teško u životnim i neobrađenim uvjetima. Stoga se razvijaju razne metode bojenja kako bi se olakšalo otkrivanje bakterija. Tri su glavne vrste tehnika bojanja: jednostavno bojanje, diferencijalno bojanje i strukturno bojanje. Diferencijalno bojanje tehnika je koja koristi više od jedne mrlje za razlikovanje bakterija. Gramove i kiselinski postojane mrlje najpopularnije su poznate kao diferencijalne mrlje. Bojenje po Gramu je tehnika diferencijalnog bojanja koja razdvaja bakterije u dvije skupine poznate kao Gram pozitivne bakterije i Gram negativne bakterije. Kiselootporna mrlja diferencijalna je mrlja koja se koristi za identificiranje kiselootpornih organizama kao što je Mycobacterium iz nekiselih organizama. To je ključna razlika između Gramove mrlje i Acid Fast mrlje.
SADRŽAJ
1. Pregled i ključna razlika
2. Što je mrlja po Gramu
3. Što je kiselina brza
4. Sličnosti između boje po Gramu i kiselina brza
5. Usporedba - usporedba Grama i kiseline u tabličnom obliku
6. Sažetak
Što je Gram Stain?
Bojanje po Gramu je važna tehnika diferencijalnog bojenja koja se koristi za identifikaciju bakterija u mikrobiologiji. Ovu je tehniku predstavio danski bakteriolog Hans Christian Gram 1884. Bojenje po Gramu kategorizira bakterije u dvije glavne skupine nazvane gram pozitivne i gram negativne, koje su vrlo važne u razvrstavanju i identifikaciji bakterija. Mikrobiolozi izvode bojanje grama kao početni korak u karakterizaciji bakterija tijekom studija.
Bakterije se grupiraju na temelju razlika u njihovoj staničnoj stijenci. Gram pozitivne bakterije sastoje se od debelog sloja peptidoglikana u njihovoj staničnoj stijenci, dok su gram negativne bakterije od tankog sloja peptidoglikana u njihovoj staničnoj stijenci. Ishod bojanja gramom temeljit će se na razlici u debljini sloja peptidoglikana stanične stijenke.
Bojenje po Gramsu vrši se naime pomoću četiri različita reagensa; primarna mrlja, mrvica, sredstvo za dekolorizaciju i kontra mrlja. Kristalna ljubičica i safranin koriste se kao primarne, odnosno suprotne mrlje, dok se grami joda i 95% alkohola koriste kao sredstvo za mrvljenje i dekoloriranje. Osnovni koraci mrlje od grama su sljedeći;
- Na čistoj pločici stakla priprema se bakterijski razmaz, zagrijava i hladi.
- Razmaz je preplavljen kristalnom ljubičastom 1-2 minute.
- Razmaz se ispire sporo tekućom vodom iz slavine kako bi se uklonile suvišne mrlje.
- Jod se nanosi na razmaz tijekom 1 minute.
- Razmaz se ispire sporo tekućom vodom iz slavine
- Razmaz se pere 95% -tnim alkoholom 2 - 5 sekundi i ispire tekućom vodom iz slavine.
- Razmaz se 1 minutu oboji safraninom
- Razmaz se ispire sporo tekućom vodom iz slavine, osuši i promatra pod mikroskopom.
Na kraju mrlje od grama, gram negativne bakterije primijetit će se u ružičastoj boji, dok će gram pozitivne bakterije biti uočene u ljubičastoj boji.
Slika 01: Gram negativne i gram pozitivne bakterije
Ishod mrlje od grama ovisi o debljini sloja peptidoglikana u njihovoj staničnoj stijenci. Tijekom koraka obezbojenja, primarna mrlja i mrvica lako se uklanjaju iz gram negativnih bakterija i postaju bezbojni jer imaju tanak sloj peptidoglikana. Primarna mrlja zadržava se u gram pozitivnim bakterijama jer imaju debeli sloj peptidoglikana. Protubojna mrlja neće biti učinkovita za gram pozitivne bakterije zbog zadržavanja primarne mrlje. Dakle, gram pozitivne bakterije bit će vidljive u primarnoj boji mrlje, odnosno u ljubičastoj boji. Protiv mrlja obojat će gram negativne bakterije i one će biti vidljive u boji odabira, odnosno safraninskoj boji. Stoga je bakterije lako kategorizirati u dvije skupine prema gramima, a dragocjeno je u diferencijaciji i identifikaciji bakterija.
Što je Acid Fast?
Kiselootpornost je fizičko svojstvo određenih bakterija, posebno njihova otpornost na obezbojenje kiselinama tijekom postupaka bojenja. Jednom obojeni, ovi se organizmi opiru razrijeđenim postupcima obezbojenja na bazi kiseline i / ili etanola uobičajenih u mnogim protokolima bojenja. Dakle, tim organizmima daje se naziv „kiselinski brz“. Ovo se svojstvo pokazuje zbog visoke razine voštanog materijala (mikoličke kiseline) u njihovim staničnim zidovima. Ovaj test je presudan za identifikaciju Mycobacterium tuberculosis.
Slika 2: Mikobakterije brze kiseline
Ovu kiselinski postojanu mrlju razvio je Paul Ehrlich 1882. Ehrlichovu kiselootpornu tehniku modificirao je Ziehl-Neelsen i sada se koristi češće. Postupak brzog bojanja kiselinom uključuje tri različita reagensa. Carbol fuschin koristi se kao primarna mrlja. Kiseli alkohol koristi se kao sredstvo za dekoloriranje. Metilen plava koristi se kao kontra mrlja. Postupak bojenja izvodi se na sljedeći način.
- Primarna mrlja (karbol fuksin) nanosi se na fiksni uzorak na staklu (sve ćelije bit će obojene crvenom bojom).
- Tobogan se zagrijava na pari 5 minuta, što mrlje pravilno tjera u stanice.
- Zatim se doda otopina za obezbojenje (Time se uklanja crvena boja iz svih stanica, osim kiselina brzih bakterija).
- Metilensko plavo dodaje se kao kontra mrlja (obojava sve obezbojene bakterijske stanice).
- Kiselinski postojane bakterije ostaju crvene, dok nestalne bakterije mrlje u plavom.
Koje su sličnosti između mrlje po Gramu i brze kiseline?
- Bojenje po Gramu i brzo kiselina dvije su razlike u tehnikama bojanja.
- Obje tehnike svrstavaju bakterije u dvije skupine.
- Obje tehnike koriste dvije mrlje i jednu u boji.
Koja je razlika između brzine Grama i kiseline?
Diff Article Sredina prije tablice
Gram Stain vs Acid Fast |
|
| Bojenje po Gramu je tehnika diferencijalnog bojanja koja razdvaja bakterije u dvije skupine Gram pozitivne i Gram negativne bakterije. | Kiselo brza mrlja je diferencijalna mrlja koja se koristi za prepoznavanje organizama otpornih na kiseline od organizama koji nisu kiseli. |
| Primarna mrlja | |
| Kristalna ljubičica je uobičajena primarna mrlja u bojanju u gramima. | Carbol fuchsin je primarna mrlja koja se koristi u kiselinama brzo. |
| Sredstvo za dekoloriranje | |
| 95% alkohol koristi se kao sredstvo za dekoloriranje u mrljama od grama. | Kiseli alkohol koristi se kao sredstvo za dekoloriranje u kiselini brzo. |
| Counter Stain | |
| Gramova mrlja koristi safranin kao kontra mrlju. | Kiselinski brza mrlja koristi metilensko plavu boju kao suprotnu mrlju. |
| Promatranje | |
| Gram negativne bakterije primjećuju se u boji odabira, a gram pozitivne bakterije u ljubičastoj boji. | Kiselootporne bakterije promatraju se u crvenoj, a nekisele bakterije u plavoj boji. |
Sažetak - Gram Stain vs Acid Fast
Vizualizacija mikroorganizama u živom stanju je teška. Stoga se biološke mrlje i postupci bojenja intenzivno koriste za proučavanje njihovih svojstava. Diferencijalno bojanje jedna je od tehnika bojanja koja se koristi za razlikovanje bakterija. Bojenje po Gramu i kiselo brzo uklanjanje dvije su različite tehnike bojanja. Bojenje po Gramu razlikuje gram negativne bakterije i gram pozitivne bakterije na temelju debljine njihovih staničnih stijenki. Kiselinski brzo bojanje razlikuje kiselootporne bakterije od nekiselih bakterija na temelju sadržaja mikolne kiseline u staničnoj stijenci. To je razlika između kisele kiseline i mrlje od grama.
Preuzmite PDF verziju Gram Stain vs Acid Fast
Možete preuzeti PDF verziju ovog članka i koristiti je u izvanmrežne svrhe prema napomeni. Ovdje preuzmite PDF verziju. Razlika između brzine Grama i kiseline.
