Razlika Između Phusion I Taq Polimeraze

2024 Autor: Mildred Bawerman | [email protected]. Zadnja promjena: 2023-12-16 08:39

Ključna razlika - Phusion vs Taq polimeraza

DNA polimeraze su široko korišteni enzimi u tehnikama molekularne biologije, a također su prirodno prisutni u svim organizmima koji se podvrgavaju replikaciji DNA. Oni su ključni polimerizacijski enzimi koji sudjeluju tijekom replikacije. DNA polimeraza je sposobna dodavati nukleotide na slobodni 3 'kraj lanca DNA, uzrokujući produženje novog lanca. Trenutno je zbog razvoja molekularne biologije u dijagnostici bolesti i industrijskoj primjeni važno proizvoditi polimeraze različitih korisnih svojstava. To povećava točnost metode i čini je bržom tehnikom. Phusion i Taq polimeraza dva su komercijalno proizvedena termostabilna enzima polimeraze koji se koriste u posebnim molekularnim primjenama. Fuzija je DNA polimeraza izolirana iz Pyrococcus furiosus i uglavnom se koristi u pokusima kloniranja kako bi se povećala vjernost. Taq DNA polimeraza je standardna DNA polimeraza koja se koristi u lančanoj reakciji polimeraze (PCR), a izolirana je od termostabilne bakterije; Thermus aquaticus. Ključna razlika između dva enzima je izvorni mikroorganizam. Fuzija je izolirana iz ekstremofila, Pyrococcus furiosus, dok je Taq polimeraza izolirana iz termofila, Thermus aquaticus. Taq polimeraza je izolirana iz termofila, Thermus aquaticus. Taq polimeraza je izolirana iz termofila, Thermus aquaticus.

SADRŽAJ

1. Pregled i ključna razlika

2. Što je Phusion

3. Što je Taq polimeraza

4. Sličnosti između Phusion i Taq polimeraze

5. Usporedba - Usporedba Phusion i Taq polimeraze u tabličnom obliku

6. Sažetak

Što je Phusion?

Fuzijska DNA polimeraza nova je polimeraza koja se proizvodi izoliranjem enzima iz Pyrococcus furiosus, koji je ekstremofilna arheja. Ti mikrobi borave u uvjetima ekstremno visokih temperatura, što polimerazu čini visoko toplinski stabilnom polimerazom. Fuzijska polimeraza koristi se za postizanje krajnje vjernosti u odnosu na konvencionalnu termostabilnu polimerazu; Taq polimeraza. Fuzijska polimeraza je sposobna pojačati dugačke predloške do 7,5 kb genomske DNA. Optimalni kapacitet polimerizacije Phusion polimeraze je na 72 ⁰ C. Phusion se također koristi u proizvodima za kloniranje za sekvenciranje, analizu ekspresije i analizu mutacija.

Fuzijska DNA polimeraza ima 3 '- 5' eksonukleaznu aktivnost. To omogućuje lektoriranje novosintetiziranog lanca nakon sinteze. Stoga se neusklađenosti nukleotida lako mogu popraviti. Dakle, ima manju stopu pogrešaka. Ukupne prednosti Phusion polimeraze su;

• Izuzetna vjernost
• Velika brzina i skraćeno vrijeme produženja
• Robustne reakcije i zahtijeva minimalnu optimizaciju
• Visok prinos

Slika 01: Fuzija

Glavni nedostatak Phusion polimeraze je taj što se inhibira u prisutnosti deoksiuridin trifosfata (dUTP). Kada se dUTP akumuliraju u reakcijskoj smjesi, to može inhibirati djelovanje Phusion polimeraze. To se sprečava tretiranjem reakcijske smjese s dUTPazom prije dodavanja enzima. Trenutno se umjesto lijeka za rješavanje ovog problema koristi Phusion polimeraza otporna na dUTP poznata kao Pfu Turbo.

Što je Taq polimeraza?

Izum Taq DNA polimeraze revolucionirao je područje molekularne biologije. Riješio je glavni problem u pojačavanju DNA. Taq DNA polimeraza je toplinski stabilan enzim polimeraze ekstrahiran i izoliran iz termofilne bakterije Thermus aquaticus. Otkriće ovih enzima dovodi do razvoja PCR-a. Ovaj enzim omogućio je upotrebu lančane reakcije polimeraze u pojačavanju DNA umjesto uobičajenih mukotrpnih tehnika kloniranja. PCR se sada koristi u molekularnoj dijagnostici, poljoprivrednim i industrijskim poljima, a tehnici je dodano mnogo novih varijacija.

Slika 02: Taq polimeraza

Taq DNA polimeraza funkcionira na optimalnom temperaturnom rasponu između 72 ⁰ C - 80 ⁰ C. Taq DNA polimeraza zahtijeva ko-faktor; magnezij za njegovu funkciju. Taq polimeraza nema sposobnost lekture 3 '- 5', stoga je stopa pogrešaka Taq DNA polimeraze velika u usporedbi s novijim vrstama DNA polimeraza poput Phusion polimeraze itd. Ali, popularnost Taq DNA polimeraze i dalje ostaje isto u cijelom svijetu znanosti zbog praktičnosti i fleksibilnosti enzima.

Koje su sličnosti između Phusion i Taq polimeraze?

• I enzimi Phusion i Taq polimeraze polimeriziraju enzimi koji su sposobni dodati nukleotide na 3 'slobodni kraj lanca DNA.
• I Phusion i Taq polimeraze zahtijevaju slijed temeljnih slojeva kako bi započele polimerizaciju.
• I Phusion i Taq polimeraze toplinski su stabilne.
• I Phusion i Taq polimeraze koriste se u PCR mehanizmima za pojačavanje DNA.
• Kada se polimeraza dodaje reakcijskoj smjesi, i Phusion i Taq polimeraze dodaju se posljednje kako bi se osigurala učinkovitost enzima.
• I Phusion i Taq polimeraze komercijalno su sintetizirane u eksperimentalne svrhe molekularne biologije.
• Za polimeruzu Phusion i Taq potreban je kofaktor da bi dovršio svoju funkciju.

Koja je razlika između Phusion i Taq polimeraze?

Diff Article Sredina prije tablice

Phusion vs Taq polimeraza
Fuzija je DNA polimeraza izolirana iz Pyrococcus furiosus i uglavnom se koristi u pokusima kloniranja kako bi se povećala vjernost.	Taq DNA polimeraza je standardna DNA polimeraza koja se koristi u lančanoj reakciji polimeraze (PCR), a izolirana je od termostabilne bakterije Thermus aquaticus.
Izvorni organizam
Fuzija se vadi iz ekstremofilnih arheja - Pyrococcus furiosus.	Ova se književna djela protežu od razdoblja kolonizacije do razdoblja dekolonizacije.
Sposobnost čitanja lekture
Sposobnost čitanja od 3 '- 5' prisutna je u Phusionu.	U Taq polimerazi nedostaje sposobnost čitanja od 3 '- 5'.
Vjernost
Visoka vjernost postoji s Phusionom.	Taq polimeraza pokazuje nisku vjernost.
Pojačanje
Fuzija je sposobna umnožavati duge fragmente DNA.	Taq polimeraza je sposobna pojačati puno kraće fragmente DNA.
dUTP Otrovanje
Akcijsko akumuliranje akumulira akciju fuzije.	DUPT ne inhibira taq polimerazu.

Sažetak - Phusion vs Taq polimeraza

Phusion i Taq DNA polimeraza dvije su toplinski stabilne polimeraze koje se koriste u PCR tehnikama. Fuzija je polimeraza izolirana iz ekstremofila, Pyrococcus furiosus, dok je Taq izolirana iz termostabilne bakterije Thermus aquaticus. Otkrivanje Taq DNA polimeraze dovodi do PCR izuma. Phusion ima mnogo prednosti u odnosu na Taq što je Phusion učinilo boljom opcijom u stvaranju DNK visoke vjernosti. Međutim, Taq polimeraza se i dalje koristi kao standardni polimerazni enzim u PCR-u. To je razlika između Phusion i Taq polimeraze.