Ključna razlika - kapilarna elektroforeza vs gelska elektroforeza
Elektroforeza je tehnika koja se koristi za odvajanje biomolekula na temelju naboja čestica, veličine i oblika čestica. Migracija molekule, poznata kao elektroforetska pokretljivost, ovisi o vrsti korištenog polimera / gela, veličini pora, predviđenom naponu, vremenu rada i omjeru površine i volumena. Postoje različite vrste tehnika elektroforeze koje se temelje na vrsti korištene biomolekule. Izumljena je prva vrsta elektroforeze bila je elektroforeza na papiru gdje je nitrocelulozni papir korišten kao medij za odvajanje biomolekula. Načelo elektroforeze u gelu gdje su se za odvajanje biomolekula koristili geli različitih veličina pora, izumljeno je kasnije. Tehnika gelske elektroforeze dodatno je modificirana kako bi se poboljšala točnost tehnike, a jedna od takvih modifikacija je kapilarna elektroforeza. Ključna razlika između kapilarne elektroforeze i gel elektroforeze je ta što se gel elektroforeza izvodi u vertikalnoj ili vodoravnoj ravnini pomoću polimernog gela standardne veličine pora, dok se kapilarna elektroforeza izvodi u kapilarnoj cijevi s polimernom tekućinom ili gelom.
SADRŽAJ
1. Pregled i ključna razlika
2. Što je elektroforeza u gelu
3. Što je kapilarna elektroforeza
4. Sličnosti između kapilarne elektroforeze i elektroforeze u gelu
5. Usporedna usporedba - Kapilarna elektroforeza nasuprot gelskoj elektroforezi u tabličnom obliku
6. Sažetak
Što je elektroforeza u gelu?
Gel elektroforeza je tehnika koja se koristi za odvajanje uglavnom nukleinskih kiselina, proteina ili aminokiselina na temelju naboja, veličine i oblika. Ova tehnika koristi fizički gel, koji je polimerna tvar, kao medij za odvajanje. Najčešće korišteni gelovi su Agaroza (za odvajanje nukleinske kiseline) i Poliakrilamid (za odvajanje proteina). Elektroforetski aparat za gel sadrži ladicu za lijevanje gela za pripremu gela, češljeve za lijevanje za pripremu jažica, spremnik spremnika, elektrode - pozitivne (anoda) i negativne (katoda) i jedinicu za napajanje naponom. Molekule poput DNA ili RNA, koje su negativno nabijene, kreću se od katode do anode, a molekule koje su pozitivno nabijene kreću se obrnuto. Priprema gela vrši se prema zahtjevu. Ako je potrebna visoka rezolucija ili odvajanje molekula,treba pripremiti gel visoke koncentracije s manjom veličinom pora. Molekule odvojene na matrici gela promatraju se nakon tehnike bojanja. Odvojene molekule pojavljuju se kao trake na matrici gela.
Slika 01: Elektroforeza u gelu
Gel elektroforeza koristi se u molekularnoj dijagnostici kao što je uzimanje DNA otisaka prstiju kako bi se utvrdila prisutnost određenog fragmenta DNA / RNA ili proteina. Elektroforeza u gelu također određuje čistoću ekstrahiranog uzorka biomolekule. Elektroforeza u gelu provodi se kao preliminarni korak za in hibridizaciju i kao potvrdna analiza nakon sekvenciranja.
Što je kapilarna elektroforeza?
Kapilarna elektroforeza je modifikacija gel-elektroforeze koja koristi isti princip odvajanja na temelju naboja, veličine molekule, ali se izvodi u kapilarnoj cijevi bilo sa supstancom gela ili tekućim polimerom. Kapilare su pripremljene od topljenog silicijevog dioksida, a svaka kapilarna cijev ima unutarnji promjer 50-100μm i duljina je 25-100cm. Uzorci se ubrizgavaju u kapilarnu cijev koja sadrži polimerni materijal i odvajaju se mnogo brže od uobičajene elektroforeze u gelu. Kapilarni sustav dobro je zaštićen unutar izolacijske košulje koja štiti uzorak od bilo kakve kontaminacije. Kapilare se mogu napuniti tekućim polimerima poput hidroksietil celuloze ili gelovima visoke rezolucije kao što je poliakrilamid. Kapilarna elektroforeza pruža veću razlučivost; stoga je odvajanje preciznije. Kapilarna elektroforeza koristi automatizirani detektorski sustav spektrofotometrijskom analizom. To je zbog većeg omjera površine i volumena.
Slika 02: Kapilarna elektroforeza
Kapilarna elektroforeza koristi se u situacijama kao što je forenzika gdje je potrebna veća preciznost i nije uobičajena jer je skupa tehnika.
Koje su sličnosti između kapilarne elektroforeze i elektroforeze u gelu?
- Razdvajanje molekula u obje tehnike temelji se na naboju i veličini molekule.
- Obje tehnike mogu se koristiti za odvajanje nukleinskih kiselina i proteina.
- Volumen uzorka obje tehnike je jednak.
- Obje tehnike koriste pufer za olakšavanje razdvajanja.
Koja je razlika između kapilarne elektroforeze i elektroforeze u gelu?
Diff Article Sredina prije tablice
Kapilarna elektroforeza vs gelska elektroforeza |
|
| Kapilarna elektroforeza je tehnika koja razdvaja biomolekule na kapilarnoj cijevi pomoću tekućeg ili gel polimernog medija. | Gel elektroforeza je tehnika koja razdvaja biomolekule na vertikalnoj ili vodoravnoj ravnini pomoću polimernog gelastog medija. |
| Odvajanje | |
| U kapilarnoj elektroforezi odvajanje se vrši unutar kapilarne cijevi. | U gel elektroforezi odvajanje se vrši na vertikalnoj ili vodoravnoj ravnini. |
| Sredina razdvajanja | |
| Tekući polimeri poput hidroksietilceluloze koriste se u kapilarnoj elektroforezi. | Gelovi, bilo agaroza ili poliakrilamid, koriste se kao medij u gelskoj elektroforezi. |
| Poprečna veza | |
| Visoka rezolucija može se dobiti kapilarnom elektroforezom. | Rezolucija je niska u elektroforezi u gelu. |
| Odnos površine i zapremine | |
| Odnos površine i volumena visok je u kapilarnoj elektroforezi. | Odnos površine i volumena je nizak u gel elektroforezi. |
| Tehnika otkrivanja | |
| Detekcija se vrši spektrofotometrijskim automatiziranim detektorima u kapilarnoj elektroforezi. | Bojenje i promatranje pomoću UV transilluminatora obavljaju se kao tehnike detekcije u gel elektroforezi. |
Sažetak - Kapilarna elektroforeza vs gelska elektroforeza
Molekularna dijagnostika igra glavnu ulogu u znanstvenom svijetu. Identifikacija i pročišćavanje DNA, RNA i proteina ključni su koraci u dijagnostičkim postupcima. Elektroforeza je tehnika koja razdvaja i identificira biomolekule i u gel elektroforezi i u vrlo naprednoj kapilarnoj gel elektroforezi. Gel elektroforeza provodi se u vertikalnoj ili vodoravnoj ravnini pomoću polimernog gela standardne veličine pora, dok se kapilarna elektroforeza izvodi u kapilarnoj cijevi s polimernom tekućinom ili gelom. To je razlika između kapilarne elektroforeze i elektroforeze u gelu. Po završetku tehnike elektroforeze, biomolekule se dalje obrađuju kako bi se dobivale informacije više razine hibridizacijom ili tehnikama poput otiska prsta.
Preuzmite PDF verziju kapilarne elektroforeze vs gelske elektroforeze
Možete preuzeti PDF verziju ovog članka i koristiti je u izvanmrežne svrhe prema napomeni. Ovdje preuzmite PDF verziju. Razlika između gelske elektroforeze i kapilarne elektroforeze.
