Ključna razlika - Gel za slaganje i Gel za odvajanje
Izrazi gel za slaganje i gel za odvajanje koriste se u objašnjavanju tehnike SDS-PAGE. SDS-PAGE ili elektroforeza u natrijevom dodecil sulfat-poliakrilamidnom gelu laboratorijska je tehnika koja se koristi za odvajanje proteinskih molekula na temelju njihove molekularne težine. Teorija koja stoji iza tehnike je da proteini s različitim molekulskim težinama pokazuju različite brzine migracije; molekule male molekulske mase migriraju brže, dok molekule velike molekulske mase polako migriraju. Medij za migraciju je gel. Postoje dvije vrste gelova koji se nazivaju gel za slaganje i gel za odvajanje. Ključna razlika između gela za slaganje i gela za odvajanje je u tome što je pH gela za slaganje 6,8, dok je pH gela za odvajanje 8,8.
SADRŽAJ
1. Pregled i ključna razlika
2. Što je gel za slaganje
3. Što je gel za odvajanje
4. Odnos između gela za slaganje i gela za odvajanje
5. Usporedba usporedno - Gel za slaganje i gel za odvajanje u tabličnom obliku
6. Sažetak
Što je gel za slaganje?
Gel za slaganje je nisko koncentrirani poliakrilamidni gel koji se stavlja na vrh koncentriranijeg gela za razdvajanje (odvajajući gel) u SDS-PAGE tehnici. Gel za slaganje koristi se za poboljšanje razlučivosti elektroforeze. Razlučivost se povećava zbog razlike između koncentracija gela za slaganje i gela za razdvajanje koji utječu na proteine u uzorku. Budući da je koncentracija poliakrilamida u gelu za slaganje niska, veličina pora je veća. To također pomaže u povećanju razdvajanja.
Gel za slaganje je rastresiti poliakrilamidni gel s velikim porama od oko 7% poliakrilamida. Te pore ne djeluju kao značajna prepreka velikim molekulama proteina. Stoga ovaj gel blago utječe na pokretljivost tih proteina. To čini razdvajanje prema pokretljivosti i veličini proteina koncentrirajući ih između dva gela.
Slika 01: SDS-PAGE akrilamidni gel
PH gela za slaganje je 6,8. Njegov je pH kiseli od pH vrijednosti gela za razlučivanje za 2 pH jedinice. Ovaj pH podrazumijeva nižu ionsku snagu, a time i veći električni otpor. To provocira pokretljivost bjelančevina od ostalih nabijenih čestica prisutnih u gelu.
Što je separacijski gel?
Gel za razdvajanje ili gel za razdvajanje SDS-PAGEtehnike visoko je koncentrirani poliakrilamidni gel koji se postavlja na vrh nisko koncentriranog gela za slaganje. Gel za razdvajanje sadrži visoku količinu poliakrilamida (10%). PH ovog gela održava se na pH = 8,8, što je viša razina pH od one u gelu za slaganje.
Slika 02: Aparat za elektroforezu u gelu
Kada molekule proteina dođu do gela za odvajanje, migracija tih molekula se usporava, jer je gel za odvajanje gel visoke koncentracije male veličine pora koji može djelovati kao značajna zapreka kretanju proteinskih molekula. Ovo usporavanje omogućuje ostalim proteinima da polako migriraju da bi ih sustigli, što rezultira uskom, koncentriranom trakom između dva gela.
Kakav je odnos između gela za slaganje i gela za odvajanje?
U istom aparatu koriste se i gel za slaganje i gel za odvajanje
Koja je razlika između gela za slaganje i gela za odvajanje?
Diff Article Sredina prije tablice
Gel za slaganje protiv gela za odvajanje |
|
| Gel za slaganje je niskokoncentrirani poliakrilamidni gel koji se stavlja na vrh koncentriranijeg gela za razdvajanje (odvajajući gel) u SDS-PAGE tehnici. | Gel za razdvajanje ili gel za razdvajanje tehnike SDS-PAGE je visoko koncentrirani poliakrilamidni gel koji se postavlja na vrh nisko koncentriranog gela za slaganje. |
| Plasman | |
| Gel za slaganje stavlja se na gel za razdvajanje (odvajanje). | Gel za odvajanje stavlja se na dno spremnika koji se koristi za gel elektroforezu. |
| Koncentracija | |
| Koncentracija gela za slaganje je velika. | Koncentracija gela za odvajanje je niska. |
| Sadržaj poliakrilamida | |
| Gel za slaganje sadrži oko 7% poliakrilamida. | Gel za odvajanje sadrži oko 10% poliakrilamida. |
| pH | |
| PH gela za slaganje je 6,8. | PH gela za odvajanje je 8,8. |
| Veličina pora | |
| Velike veličine pora prisutne su u gelu za slaganje. | Male veličine pora prisutne su u gelu za odvajanje. |
| Razlučivost | |
| Gel za slaganje daje bolju razlučivost. | Gel za odvajanje daje lošu razlučivost. |
Sažetak - Gel za slaganje protiv gela za odvajanje
Gel za slaganje i gel za odvajanje dvije su vrste poliakrilamidnih gelova koji se koriste za bolje odvajanje proteinskih molekula u danom uzorku. Razlika između gela za slaganje i gela za odvajanje je u tome što je pH gela za slaganje 6,8, dok je pH gela za odvajanje 8,8.
