Ključna razlika - RNASE A u odnosu na RNASE H
Ribonukleaze su nukleaze koje specifično razgrađuju RNA u manje jedinice. Mogu se podijeliti u dvije kategorije; endoribonukleaze i egzoribonukleaze. Endoribonukleaza je endonukleaza koja može razgraditi jednolančanu ili dvolančanu RNA. Ona cijepa fosfodiesterske veze unutar lanca RNK polinukleotida. Primjeri su RNaza A, RNaza III, RNaza T1, RNaza P i RNaza H. Egzorbonukleaza je eksonukleaza koja je razgradila RNK uklanjanjem krajnjih nukleotida bilo s 5 ili s kraja molekule RNA. Primjeri su RNase R, RNase II, RNase D i RNase PH. Ključna razlika između RNASE A i RNASE H je u tome što je RNase A ribonukleaza gušterače koja specifično razgrađuje jednolančanu RNA u manje komponente dok je RNase H nespecifični enzim koji cijepi RNA u hibridnom RNA-DNA na manje jedinice putem hidrolitički mehanizam.
SADRŽAJ
1. Pregled i ključna razlika
2. Što je RNASE A
3. Što je RNASE H
4. Sličnosti između RNASE A i RNASE H
5. Usporedna usporedba - RNASE A u odnosu na RNASE H u tabličnom obliku
6. Sažetak
Što je RNASE A?
RNaza A je ribonukleaza gušterače koja specifično cijepa nesparene ostatke citozina i uracila na 3 'kraju jednolančane RNA. RNaza H djeluje pri višoj koncentraciji soli (0,3M ili veća koncentracija NaCl). Hidrolitička reakcija je u dva koraka. Tvori 3 'fosforilirani proizvod putem 2', 3 'cikličkog interfosfatnog intermedijera. Iako je specifična za jednolančanu RNA pri višoj koncentraciji soli, ona također može razgraditi dvolančanu RNA i RNA u hibridnom RNA-DNA pri nižoj koncentraciji NaCl (nižoj od 0,3 M NaCl).
Bruce Merrifield prvi je sintetizirao ovaj enzim. RNaza A vrlo je popularan enzim u molekularnim istraživanjima. RNaza A goveđe gušterače primjer je RNaze A. I jedan je od najtvrđih enzima koji se koriste u laboratoriju. Ovom enzimu nije potreban kofaktor za njegovo djelovanje. To je visoko termostabilan enzim. RNaza A prvi je enzim i treći protein kojem je otkrivena ispravna sekvenca aminokiselina. Ovaj enzim je vrlo malen sa 124 aminokiseline i molekularnom masom od 12600da. Ima četiri ostatka histidina (His 12 i His 119 koji sudjeluju u katalitičkoj reakciji).
Slika 01: RNaza A
RNaza A može se izolirati kuhanjem sirovog uzorka. Kad zavrije, svi ostali enzimi razgrađuju preostalu RNazu A. RNaza A je nevjerojatno stabilan enzim. Ovaj enzim inhibira s proteinima inhibitorima ribonukleaze, kompleksima teških metala i uridin vanadata.
Što je RNaza H?
RNaza H je nespecifični enzim ribonukleaze koji hidroliznom reakcijom može razgraditi RNA u hibridnom RNA-DNA. RNaza H cijepa 3'- OP vezu RNA u hibridnom RNA-DNA. U konačnici proizvodi 3'OH i 5 'fosfat završene proizvode. U replikaciji DNA igra ključnu ulogu uklanjanjem RNA početnika nakon stvaranja novih DNA lanaca. U laboratorijskim uvjetima specifično razgrađuje RNK u hibridnoj RNA-DNA, ali ne i DNA i nehibridiziranoj RNA. I ovaj se enzim obično koristi za uništavanje RNA predloška nakon što se tijekom sinteze cDNA stvori prvi komplementarni DNA lanac.
Slika 02: RNaza H
RNaza H se također koristi u testovima zaštite nukleaze. Također se može uklopiti u uklanjanje poli A repa iz mRNA. RNaza H ima sposobnost uništavanja nekodirajuće RNA unutar i izvan stanice. Ioni metala potrebni su kao kofaktori za ovu aktivnost proteina. Kelator (EDTA) se može koristiti za inhibiciju enzima RNaza H.
Koje su sličnosti između RNASE A i RNASE H?
- Oboje su u prirodi proteini.
- Oboje su endoribonukleaza
- Oboje mogu razgraditi RNA.
- Oboje izvode hidrolitičke reakcije.
- Molekularni laboratoriji koriste i jedno i drugo.
Koja je razlika između RNASE A i RNASE H?
Diff Article Sredina prije tablice
RNASE A vs RNASE H |
|
| RNaza A je ribonukleaza gušterače koja specifično cijepa 3 'kraj nesparenih ostataka citozina i uracila jednolančane RNA pri višoj koncentraciji soli. | RNaza H je nespecifični enzim ribonukleaze koji hidroliznom reakcijom može razgraditi RNA u hibridnom RNA-DNA. |
| Priroda cijepanja RNA | |
| RNaza A specifično cijepa jednolančanu RNA pri višoj koncentraciji soli. | RNaza H cijepa RNK u hibridnom RNA-DNA. |
| Potreba ko-faktora za aktivnost | |
| RNaza A ne treba kofaktore za svoju aktivnost. | RNazi H potrebni su metalni ioni kao kofaktori za svoje djelovanje. |
| Inhibitori aktivnosti proteina | |
| Proteini inhibitora ribonukleaze, kompleksi teških metala i uridin vanadata inhibiraju aktivnost RNAse A. | Kelator (EDTA) inhibira aktivnost RNaze H. |
| Uklanjanje početnog sloja RNA u replikaciji DNA | |
| RNaza A se ne koristi za uklanjanje RNA početnika u replikaciji DNA. | RNaza H koristi se za uklanjanje RNA početnika u replikaciji DNA |
| Uklanjanje predloška DNA u komplementarnoj sintezi DNA (C-DNA) | |
| RNaza A se ne koristi za uklanjanje predloška RNA tijekom komplementarne sinteze DNA (C-DNA). | RNaza H koristi se za uklanjanje predloška RNA tijekom komplementarne sinteze DNA (C-DNA). |
| Uklanjanje poli-A-repa u mRNA hibridiziranoj s Oligo (dt) | |
| RNaza A se ne koristi za uklanjanje "poli-A repa" u mRNA hibridiziranoj u oligo (dt). | RNaza H koristi se za uklanjanje "poli-A repa" u mRNA hibridiziranoj u oligo (dt) |
Sažetak - RNASE A vs RNASE H
Ribonukleaze su enzimi nukleaze koji imaju sposobnost cijepanja RNA na manje jedinice. Dvije su vrste; endoribonukleaze i egzoribonukleaze. Endoribonukleaza je endonukleaza koja ima sposobnost razgradnje jednolančane ili dvolančane RNA. I cijepa fosfodiestersku vezu unutar RNA polinukleotidnog lanca. RNaza A i RNaza H dvije su endoribonukleaze. RNaza A je ribonukleaza gušterače koja specifično cijepa nesparene ostatke citozina i uracila na 3 'kraju jednolančane RNA pri većoj koncentraciji soli. RNaza H je nespecifični enzim ribonukleaze koji hidroliznom reakcijom može razgraditi RNA u hibridnom RNA-DNA. To je razlika između RNaze A i RNaze H.
Preuzmite PDF RNASE A vs RNASE H
Možete preuzeti PDF verziju ovog članka i koristiti je u izvanmrežne svrhe prema napomeni. Ovdje preuzmite PDF verziju. Razlika između RNASE A i RNASE H
