Ključna razlika - In situ hibridizacija nasuprot imunohistokemiji
Dijagnostika raka i zaraznih bolesti popularan je trend u kojem se nove tehnike temeljene na proteomici i genomici koriste u svrhu identificiranja tumora ili zaraznih stanica, njihove proliferacije i mjesta razvoja stanica te analize genetske osnove većine zaraznih i nezaraznih bolesti. To će rezultirati točnom obradom i dizajniranjem lijekova te razvojem prilagođenih terapija za bolesti. In situ hibridizacija (ISH) i imunohistokemija (IHC) dvije su tako široko korištene tehnike u biologiji karcinoma, a ključna razlika između in situ hibridizacije i imunokemije leži u molekulama koje se koriste u postupku analize. U ISH se u analizi koriste sonde nukleinske kiseline, dok se u IHC za dijagnostičko određivanje koriste monoklonska i poliklonska antitijela.
SADRŽAJ
1. Pregled i ključna razlika
2. Što je in situ hibridizacija
3. Što je imunohistokemija
4. Sličnosti između in situ situ hibridizacija i imunohistokemija
5. Usporedna usporedba - In situ hibridizacija nasuprot imunohistokemiji u tabličnom obliku
6. Sažetak
Što je In Situ hibridizacija (ISH)?
In situ hibridizacija je tehnika hibridizacije nukleinske kiseline koja se izravno izvodi na dijelu ili presjeku tkiva, u cijelom tkivu ili u stanicama. Tehnika ovisi o teoriji komplementarnog uparivanja baza Watson Cricka, što rezultira ili DNA-DNA hibridima ili DNA-RNA hibridima koji mogu otkriti mutirane gene ili identificirati traženi gen od interesa. Jednolančane DNA sekvence, dvolančane DNA sekvence, jednostruke RNA sekvence ili sintetički oligonukleotidne sekvence koriste se kao sonde tijekom tehnike hibridizacije, a te sonde su označene radioaktivnim fosforom na svom 5 'kraju za postupke identifikacije na autoradiografiji ili su obilježene fluorescentnim bojama. Dostupne su različite vrste ISH tehnika temeljene na vrsti korištene sonde i vrsti tehnike vizualizacije koja se slijedi.
Slika 01: Fluorescentna hibridizacija u situaciji
Mnogo je primjena ISH, uglavnom u molekularnoj dijagnostici zaraznih bolesti kako bi se utvrdila prisutnost patogena i kako bi se molekularna dijagnostika potvrdila. Također se koristi u područjima razvojne biologije, kariotipizacije i filogenetske analize te fizičkog mapiranja kromosoma.
Što je imunohistokemija (IHC)?
U tehnici IHC, glavna analizirana molekula je antigen. Tijekom IHC, monoklonska i poliklonska antitijela koriste se za određivanje prisutnosti antigena nakon infekcije ili statusa maligne proliferacije stanica. Tehnika se temelji na vezivanju antigena i antitijela, a za ovu tehniku koriste se enzimske oznake; jedna od takvih primjena je ELISA (enzimski povezani imunosorbentni test). Markeri također mogu biti antitijela s fluorescentnim oznakama ili radioaktivno obilježena antitijela.
Slika 02: Imunohistokemija
IHC se široko koristi za otkrivanje stanica karcinoma. Dijagnostički postupci ciljaju antigene prisutne na stanicama tumora kako bi identificirali i karakterizirali tumor. Isti postupak ugrađen je za dijagnosticiranje zaraznih sredstava. Monoklonska i poliklonska antitijela također se koriste za analizu različitih genskih proizvoda omogućavanjem reakcije vezanja antitijelo-antigen između željenog proteina i primijenjenog sintetskog antitijela.
Koje su sličnosti između in situ hibridizacije i imunohistokemije?
- ISH i IHC su visoko specifične reakcije.
- Obje su tehnike vrlo precizne.
- Obje tehnike mogu se koristiti u dijagnostici karcinoma i zaraznih bolesti.
- Te se tehnike izvode u sterilnim in vitro okruženjima.
- Obje su brze tehnike koje daju ponovljive rezultate.
- ISH i IHC koriste se metodama detekcije kao što su radioobilježavanje i tehnike fluorescencije.
Koja je razlika između in situ hibridizacije i imunohistokemije?
Diff Article Sredina prije tablice
In Situ Hibridizacija vs Imunohistokemija |
|
| ISH je tehnika hibridizacije nukleinske kiseline koja se izravno izvodi na dijelu ili dijelu tkiva ili cijelom tkivu. | IHC je tehnika u kojoj se monoklonska i poliklonska antitijela koriste za određivanje prisutnosti antigena, koji su posebni proteinski biljezi postavljeni na staničnim površinama. |
| Analizirana vrsta bio molekula | |
| ISH analizira nukleinske kiseline. | IHC analizira proteine-antigene. |
| Osnova biokemijske reakcije | |
| U ovoj se tehnici događa komplementarno uparivanje baze između DNA-DNA ili DNA-RNA. | Interakcije antigen-antitijelo uključene su u imunohistokemiju. |
| Metode otkrivanja povezane s enzimima | |
| Metode otkrivanja povezane s enzimima ne mogu se koristiti u ISH. | Metode detekcije povezane enzimom mogu se koristiti u IHC. |
Sažetak - In situ hibridizacija nasuprot imunohistokemiji
Molekularna dijagnostika brze su i potvrdne metode koje se mogu koristiti za identificiranje nezarazne bolesti poput raka ili zarazne bolesti poput HIV-a ili tuberkuloze na temelju molekularnih biljega prisutnih na stanicama koji dovode do manifestacije bolesti. Molekularni biljezi mogu biti prisutni u obliku eksprimiranih proteina ili na genetskoj razini na temelju koje se uvode različite nove tehnike za povećanje učinkovitosti i manje su zahtjevne, iako ove tehnike uključuju visoke troškove. Stoga ISH ovisi o formiranju DNA-DNA ili DNA-RNA hibrida, a IHC ovisi o specifičnim reakcijama između antitijela i antigena. To je razlika između in situ hibridizacije.
Preuzmite PDF verziju Initu situ hibridizacije nasuprot imunohistokemiji
Možete preuzeti PDF verziju ovog članka i koristiti je u izvanmrežne svrhe prema napomeni. Ovdje preuzmite PDF verziju. Razlika između in situ situ hibridizacije i imunohistokemije.
