Ključna razlika - imunofluorescencija nasuprot imunohistokemiji
Dijagnostika bolesti, koja koristi molekularno biološke metode, postala je novo područje kliničke laboratorijske tehnologije. Uključuje sve testove i metode za identificiranje bolesti i razumijevanje uzroka bolesti analizom DNA, RNA ili eksprimiranih proteina u organizmu. Brzi napredak u molekularnoj dijagnostici omogućio je osnovno istraživanje zaraznih i nezaraznih bolesti. Oni se koriste za određivanje promjena u slijedu ili razinama ekspresije u ključnim genima ili proteinima koji su uključeni u bolest. Imunofluorescencija (IF) i imunohistokemija (IHC) dvije su tako široko korištene tehnike u biologiji karcinoma. IF je vrsta IHC-a gdje se metoda detekcije fluorescencije koristi za analizu monoklonskih i poliklonskih protutijela, dok IHC koristi metode utemeljene na kemijskim sredstvima za otkrivanje monoklonskih i poliklonskih protutijela. To je ključna razlika između IF i IHC.
SADRŽAJ
1. Pregled i ključna razlika
2. Što je imunofluorescencija
3. Što je imunohistokemija
4. Sličnosti između imunofluorescencije i imunohistokemije
5. Usporedna usporedba - Imunofluorescencija i imunohistokemija u tabličnom obliku
6. Sažetak
Što je imunofluorescencija (IF)?
Imunofluorescencija je tehnika detekcije gdje se antitijela korištena u testu obilježavaju pomoću fluorescentnih boja ili fluorescentnih proteina u svrhu detekcije. Označena sekundarna antitijela mogu rezultirati neželjenim pozadinskim signalima; stoga se IF tehnika zasniva na obilježavanju samog primarnog antitijela trenutno kako bi se izbjegli neželjeni signali tijekom detekcije. Ovom se tehnikom sprječava nespecifično vezanje između primarnog i sekundarnog antitijela i brže je jer nije uključen sekundarni korak inkubacije. Poboljšana je i kvaliteta podataka.
Slika 01: Dvostruko imunofluorescentno bojanje za BrdU, NeuN i GFAP
Fluorokromi ili fluorescentne boje su spojevi koji mogu apsorbirati zračenje, po mogućnosti ultra ljubičasto zračenje koje se pobuđuje. Kad čestice dođu u osnovno stanje iz pobuđenog stanja, emitiraju zračenje koje detektor uhvati i detektira kako bi stvorio spektar. Od velike je važnosti da je fluorescentna oznaka kompatibilna i stabilna za određenu reakciju te da je treba pravilno konjugirati s antitijelom kako bi se dobili točni rezultati. Jedan od najčešće korištenih fluorokroma je fluorescein izotiocijanat (FITC), koji je zelene boje, s valnim duljinama apsorpcije i emisije vrha od 490 nm, odnosno 520 nm. Rodamin, drugo sredstvo koje se koristi u IF, crvene je boje i ima različite valne duljine apsorpcije i emisije vrha od 553 nm i 627 nm.
Što je imunohistokemija (IHC)?
IHC je metoda molekularnog ispitivanja koja se provodi kako bi se identificirala i potvrdila prisutnost antigena u ciljnoj stanici. Ciljna stanica može biti zarazna čestica, mikrobni patogen ili maligna tumorska stanica. IHC koristi monoklonska i poliklonska antitijela kako bi utvrdio prisutnost antigena prisutnih na staničnoj površini ciljnih stanica. Tehnika se temelji na vezivanju antigena i antitijela. Marker detekcije konjugiran je s tim antitijelima kako bi se utvrdila prisutnost ili odsutnost određenog antigena. Ovi markeri mogu biti kemijski markeri kao što su enzimi, fluorescentno označena antitijela ili radioaktivno obilježena antitijela.
Slika 02: Presjek mozga miša obojen imunohistokemijom
Najpopularnija primjena IHC je u biologiji stanica raka kako bi se utvrdila prisutnost zloćudnih tumora, ali koristi se i za otkrivanje zaraznih bolesti.
Koje su sličnosti između imunofluorescencije i imunohistokemije?
- Imunofluorescencija i imunohistokemija odvijaju se u uvjetima in vitro.
- Obje tehnike temelje se na antigenu-antitijelu
- Obje su vrlo brze tehnike.
- Rezultati tehnika su ponovljivi.
- Oboje su poboljšali kvalitetu podataka.
- Ove se tehnike koriste u dijagnostici karcinoma i zaraznih bolesti.
Koja je razlika između imunofluorescencije i imunohistokemije?
Diff Article Sredina prije tablice
Imunofluorescencija vs imunohistokemija |
|
| IF je tehnika detekcije gdje su antitijela korištena u testu označena upotrebom fluorescentnih boja ili fluorescentnih proteina za detekciju. | IHC je tehnika detekcije gdje se antitijela korištena u analizi obilježavaju kemikalijama ili radioaktivnim elementima za detekciju. |
| Točnost | |
| Točnost je veća u IF tehnici u odnosu na IHC. | Točnost je niža u IHC. |
| Specifičnost | |
| AKO je konkretniji. | IHC je manje specifičan. |
Sažetak - Imunofluorescencija vs imunohistokemija
Molekularni mehanizmi doveli su do mnogih promjena na polju medicine, što je dovelo do naprednih metoda molekularnog ispitivanja koje su donijele revolucije na polju dijagnostike. Ovi izumi doveli su do brze i točne identifikacije i potvrde bolesti, omogućujući tako uspješnu primjenu i proizvodnju lijekova. Te se tehnike također koriste u farmakologiji kako bi se pronašle ciljeve lijekova i potvrdile farmakokinetička svojstva lijeka tijekom metabolizma lijeka. IF i IHC dvije su dijagnostičke metode koje se temelje na konceptu vezivanja antigena i antitijela, iako se način otkrivanja u obje tehnike razlikuje. IF koristi princip fluorescencije za otkrivanje antigena, a IHC koristi koncept kemijske konjugacije za otkrivanje antigena. To je razlika između IF i IHC.
Preuzmite PDF verziju imunofluorescencije vs imunohistokemije
Možete preuzeti PDF verziju ovog članka i koristiti je u izvanmrežne svrhe prema napomeni. Ovdje preuzmite PDF verziju. Razlika između imunofluorescencije i imunohistokemije.
