Ključna razlika - protočna citometrija u odnosu na FACS
U kontekstu stanične teorije, stanice su osnovna strukturna i funkcionalna jedinica svih živih organizama. Sortiranje stanica je metodologija koja se koristi za odvajanje različitih stanica prema fiziološkim i morfološkim značajkama. Mogu biti unutarćelijskih ili izvanstaničnih karakteristika. Interakcija DNA, RNA i proteina smatra se unutarćelijskim interaktivnim svojstvima, dok se oblik, veličina i različite površinske bjelančevine smatraju izvanćelijskim svojstvima. U suvremenoj znanosti metodologije sortiranja stanica dovele su do pomaganja različitim istraživanjima u biološkim studijama, a također i u uspostavljanju novih principa istraživanjem medicine. Sortiranje stanica provodi se na različitim metodologijama koje uključuju primitivne s manje opreme i napredne tehnološke metodologije uz upotrebu sofisticiranih strojeva. Protočna citometrija, sortiranje fluorescentno aktiviranim stanicama (FACS), odabir magnetskih stanica i sortiranje pojedinačnih stanica glavne su korištene metodologije. Protočna citometrija i FACS razvijeni su kako bi diferencirali stanice prema njihovim optičkim svojstvima. FACS je specijalizirana vrsta protočne citometrije. Protočna citometrija je metodologija koja se koristi tijekom analize heterogene populacije stanica prema različitim molekulama, veličini i volumenu stanične površine, što omogućuje istraživanje pojedinačnih stanica. FACS je postupak kojim se mješavina uzoraka stanica sortira prema njihovim karakteristikama rasipanja svjetlosti i fluorescencije u dva ili više spremnika. To je ključna razlika između protočne citometrije i FACS-a.
SADRŽAJ
1. Pregled i ključna razlika
2. Što je protočna citometrija
3. Što je FACS
4. Sličnosti između protočne citometrije i FACS-a
5. Usporedna usporedba - Protočna citometrija u odnosu na FACS u tabličnom obliku
6. Sažetak
Što je protočna citometrija?
Protočna citometrija metoda je koja se koristi za ispitivanje i određivanje ekspresije unutarstaničnih molekula i stanične površine te za definiranje i karakterizaciju različitih tipova stanica. Također se koristi za određivanje volumena i veličine stanice te za procjenu čistoće izoliranih subpopulacija. To omogućuje približno parametarsku procjenu pojedinačnih stanica u približno isto vrijeme. Protočna citometrija koristi se za mjerenje intenziteta fluorescencije koja nastaje zbog fluorescentno obilježenih antitijela koja pomažu u identificiranju proteina ili liganda koji se vežu na pridružene stanice.
Slika 01: Protočna citometrija
Općenito, protočna citometrija uglavnom uključuje tri podsustava. Oni su fluidici, elektronika i optika. U protočnoj citometriji dostupno je pet glavnih komponenata koje se koriste u sortiranju stanica. Oni su, protočna ćelija (struja tekućine koja se koristi za njihov transport i poravnanje ćelija za postupak optičkog očitavanja), mjerni sustav (može biti različitih sustava, uključujući živine i ksenonske žarulje, vodene hlađene velike snage ili laseri zračnog hlađenja male snage ili diodni laseri), ADC; Analogno-digitalni pretvarač, pojačalo i računalo za analizu. Akvizicija je postupak kojim se podaci prikupljaju iz uzoraka pomoću protočnog citometra. Ovaj proces posreduje računalo koje je povezano s protočnim citometrom. Softver prisutan u računalu analizira informacije koje se računalu dovode iz protočnog citometra. Softver također ima mogućnost podešavanja parametara eksperimenta kontrolirajući protočni citometar.
Što je FACS?
U kontekstu protočne citometrije, sortiranje stanica aktivirano fluorescencijom (FACS) metoda je koja se koristi za razlikovanje i sortiranje uzorka smjese bioloških stanica. Stanice su odvojene od dva ili više spremnika. Metoda sortiranja temelji se na fizičkim značajkama stanice koje uključuju svojstva raspršivanja svjetlosti i fluorescencije stanice. Ovo je važna znanstvena tehnika koja se može koristiti za dobivanje pouzdanih kvantitativnih i kvalitativnih rezultata fluorescentnih signala koji se emitiraju iz svake stanice. Tijekom FACS-a, u početku, prethodno dobivena smjesa stanica; suspenzija je usmjerena u središte uskog mlaza tekućine koji brzo teče. Protok tekućine dizajniran je tako da odvaja stanice u suspenziji na temelju promjera svake stanice. Na struju suspenzije primjenjuje se mehanizam vibracija što rezultira stvaranjem pojedinačnih kapljica.
Slika 02: FACS
Sustav je kalibriran kako bi stvorio jednu kapljicu s jednom ćelijom. Neposredno prije stvaranja kapljica, suspenzija protoka kreće se duž uređaja za mjerenje fluorescencije koji otkriva fluorescentnu karakteristiku svake stanice. Na mjestu stvaranja kapljica postavlja se električni prsten za punjenje kojim se naboj inducira u prsten prije mjerenja intenziteta fluorescencije. Jednom kad se kapljice formiraju iz struje suspenzije, naboj se zarobi unutar kapljica, koji zatim ulazi u elektrostatički sustav skretanja. Prema punjenju, sustav preusmjerava kapljice u različite spremnike. Način primjene naboja razlikuje se ovisno o različitim sustavima koji se koriste u FACS-u. Oprema koja se koristi u FACS-u poznata je kao sortirnica stanica aktivirana fluorescencijom.
U čemu je sličnost protočne citometrije i FACS-a?
Protočna citometrija i FACS razvijeni su za razlikovanje stanica prema njihovim optičkim svojstvima
Koja je razlika između protočne citometrije i FACS-a?
Diff Article Sredina prije tablice
Protočna citometrija vs FACS |
|
| Protočna citometrija je metodologija koja se koristi tijekom analize heterogene populacije stanica prema različitim molekulama, veličini i volumenu stanične površine, što omogućuje istraživanje pojedinačnih stanica. | FACS je postupak kojim se mješavina uzoraka stanica sortira prema njihovim karakteristikama rasipanja svjetlosti i fluorescencije u dva ili više spremnika. |
Sažetak - Protočna citometrija nasuprot FACS
Stanica je osnovna strukturna i funkcionalna jedinica svih živih organizama. Sortiranje stanica je postupak kojim se stanice izoliraju i diferenciraju u različite kategorije na temelju njihovih unutarćelijskih i izvanstaničnih svojstava. Protočna citometrija i FACS dvije su važne metodologije u sortiranju stanica. Oba su procesa razvijena za razlikovanje stanica prema njihovim optičkim svojstvima. Protočna citometrija je metodologija koja se koristi tijekom analize heterogene populacije stanica prema različitim molekulama, veličini i volumenu stanične površine, što omogućuje istraživanje pojedinačnih stanica. FACS je postupak kojim se mješavina uzoraka stanica sortira prema njihovim karakteristikama rasipanja svjetlosti i fluorescencije u dva ili više spremnika. To je razlika između protočne citometrije i FACS-a.
Preuzmite PDF verziju protočne citometrije vs FACS
Možete preuzeti PDF verziju ovog članka i koristiti je u izvanmrežne svrhe prema napomeni. Ovdje preuzmite PDF verziju. Razlika između protočne citometrije i FACS-a
