Razlika Između YAC I M13 Phage Vector

2024 Autor: Mildred Bawerman | [email protected]. Zadnja promjena: 2023-12-16 08:39

Ključna razlika - YAC vs M13 Phage Vector

Kloniranje DNA važan je postupak koji omogućuje širenje važnih fragmenata DNA organizama. Potrebno je spajanje specifične DNA s vektorskom DNA kako bi se stvorila rekombinantna DNA koja se pretvara u organizam domaćina. Vektor je molekula DNA koja se ponaša kao sredstvo za prijenos stranog genetskog materijala u drugu stanicu ili organizam. Trebao bi se moći replicirati unutar organizma domaćina i proizvesti višestruke kopije rekombinantne DNA. Postoje različite vrste vektora koji se koriste u kloniranju DNA. Umjetni kromosom kvasca (YAC) i vektor faga M13 dvije su vrste među njima. Ključna razlika između vektora YAC i M13 je da je YAC umjetni kromosom koji se replicira u stanicama kvasca, dok je vektor M13 faga jednolančana kružna DNA bakteriofaga M13 koji se replicira u stanicama E Coli.

SADRŽAJ

1. Pregled i ključna razlika

2. Što je YAC

3. Što je M13 fažni vektor

4. Usporedna usporedba - YAC vs M13 fage vektor

5. Sažetak

Što je YAC vektor?

YAC je umjetno izgrađeni kromosom koji ima sposobnost nositi velik segment strane DNA i replicirati se unutar stanica kvasca. Ima centromere, telomere i autonomno replicirajuće sekvence neophodne za replikaciju i stabilnost. YAC bi također trebao nositi selektivni marker ili markere i restrikcijska mjesta kako bi postao učinkovit vektor kloniranja. Velike sekvence u rasponu od 1000 kb do 2000 kb mogu se umetnuti u YAC i prenijeti u kvasac.

Slika 01: YAC vektor

Što je M13 Phage Vector?

Bakteriofag M13 je virus koji inficira i razmnožava se u E Coli. Genom bakterije M13 bakterije je male veličine, oko 6,7 kb. To je jednolančana, kružna i pozitivno osjetljiva DNA. Ovaj virus posebno inficira bakterije E Coli putem F pilusa. Jednom kada uđe u ssDNA u bakteriju, ona sintetizira njezin komplementarni lanac i postaje dsDNA ili replikativni oblik (RF) M13. RF se može ponašati poput plazmida u organizmu domaćina. DsDNA se replicira unutar E Coli i stvara ssDNA koja nosi nove fage. Ti se novi fagi kontinuirano oslobađaju iz E Coli bez ubijanja stanice domaćina. Međutim, infekcija usporava rast E Coli. dsDNA se može ekstrahirati iz bakterijskih stanica i koristiti kao vektori u kloniranju DNA. Poznati su kao M13 fagi vektori. Njima se lako može manipulirati i koristiti slično plazmidnim vektorima.

Inherentna sposobnost infekcije ovih M13 faga služi kao dobra kvalifikacija koja se koristi kao vektor u kloniranju gena. Kada se M13 pretvara u vektor, nekoliko elemenata treba ugraditi u njegov genom. Oni su, gen za protein lac represora (lac I), operativno-proksimalno područje lac Z gena, lac promotor i višestruko mjesto kloniranja (polilinker). Kada se dsDNA M13 koristi kao vektori, može se tretirati kao plazmidni vektor. Međutim, upotreba ssDNA M13 ima prednosti u sekvenciranju DNA i mutagenezi usmjerenoj na mjesto.

Budući da vektor M13 faga nosi višestruko mjesto kloniranja u lacZ regiji, rekombinirani vektori mogu se lako prepoznati skriningom plavo-bijele kolonije na pločama s agarima koji sadrže IPTG i X-Gal. Plave pločice proizvedene na pločama ne sadrže rekombinirane fage. Stoga se u svrhu kloniranja mogu odabrati fagi s umetcima.

Slika 02: Bakteriofag M13

Koja je razlika između YAC i M13 Phage Vector?

Diff Article Sredina prije tablice

YAC vs M13 Phage Vector
YAC je genetski modificirani kromosom koji ima sposobnost nositi velik segment strane DNA i replicirati se unutar stanica kvasca.	M13 fagi vektor je virusni vektor koji je razvio bakteriofag M13 koji se koristi za umetanje strane DNA u E Coli.
Svrha
YAC-ovi su dizajnirani za kloniranje velikih fragmenata genomske DNA u kvasac.	Vektori faga M13 koriste se za umetanje strane DNA u E Coli.
Duljina umetanja
YAC-ovi mogu sadržavati genomske umetke veličine megabaze (1000 kb - 2000 kb).	Veličina umetaka je oko 1500 bps.
Izgradnja
YAC DNK je teško pročistiti netaknutim i zahtijeva visoku koncentraciju za stvaranje YAC vektorskog sustava.	Javlja se putem cikličkog fotosintetskog elektronskog lanca.
Stabilnost
YAC je nestabilan.	M13 fagi se lako mogu izvući.
Veličina
Enzimi su veće molekule.	M13 fagi su stabilni od YAC.

Sažetak - YAC vs M13 Phage Vector

YAC je umjetno izgrađeni vektorski sustav koji koristi određeno područje kromosoma kvasca za umetanje velikih segmenata genetskog materijala u stanice kvasca. M13 fagi vektor je vektorski sustav izveden iz bakteriofaga M 13 koji koristi E coli kao organizam domaćina. To je glavna razlika između YAC i M13 Phage Vector. Obje su jednako korisne u tehnologiji rekombinantne DNA i kloniranju gena.